実験医学別冊 細胞・組織染色の達人
特記事項：
- 改訂版 →実験医学別冊 改訂 細胞・組織染色の達人
目次
- 特集 細胞・組織染色の達人
実験を正しく組む、行う、解釈する免疫染色とISHの鉄板テクニック
序章 染色をはじめる前に考えること
1.免疫染色とin situ Hybridization
2.蛍光か発色か？
3.染色をはじめるにあたって，最初に考えること
第1章 動物の解剖と固定
[1] 動物実験をはじめる前に
1.適切な動物実験を行うための一般原則
2.適正な動物飼育を行うための動物福祉
3.マウス・ラットの試料採取に必要な麻酔薬と安楽死処置
4.最後に
[2]切片・固定液の種類と器具の準備
1.切片の種類
2.動物の解剖～切片作製までの流れ
3.固定液の種類と組成
4.解剖，灌流固定に用いる実験器具
[3]解剖，灌流固定法の実際
1.灌流固定か，浸漬固定か？
2.灌流固定の方法
第2章 組織のサンプリング
[1]灌流固定を必要とする組織
1.脳
2.下垂体
3.脊髄
4.後根神経節
5.肝臓
6.腎臓，副腎
7.膵臓
8.脾臓
9.気管＋甲状腺
10.胸腺
11.唾液腺
12.舌
13.白色脂肪，褐色脂肪
14.子宮，卵巣
15.乳腺
[2]灌流固定を必要としない組織
1.胃，十二指腸
2.小腸，大腸
3.皮膚
4.眼
5.骨組織(1)：大腿骨
6.骨組織(2)：膝関節
7.骨組織(3)：内耳（蝸牛）
8.骨組織(4)：歯（下顎）
9.血管
10.胎仔，新生仔，胎盤
11.筋肉
12.精巣，精巣上体
13.ゼノグラフト
[3]どちらでもよい組織
1.心臓
2.骨髄
3.膀胱
4.肺
[4]培養細胞のサンプリング
1.調製方法の種類と選び方
2.プロトコール
3.染色例
第3章 ブロック作製
[1]組織の前処理
1 パラフィン包埋のための固定後の処理
2 脱脂
3 脱灰
[2] パラフィンブロックの作製（包埋）
1 パラフィン包埋
2 ブロックの成形
3 パラフィンブロックの保存
[3] 凍結ブロックの作製
1 未固定凍結ブロックの作製
2 既固定凍結ブロックの作製
3 凍結ブロックの保存
第4章 薄切
[1] パラフィン切片の作製と保存
1 切片の厚み
2 パラフィン切片作製の手順
3 パラフィン切片の保存
[2] 凍結切片の作製と保存
1 凍結切片作製時の温度・厚さ
2 凍結切片作製の手順
第5章 免疫組織化学染色
[1] 抗体を選ぶ
1 抗体の候補を選ぶ
2 候補の絞込
[2] 染色の流れ
1 条件検討に用いる切片の準備
2 脱パラフィン～前処理（抗原賦活化，各種ブロッキングなど）
3 一次抗体反応
4 検出系
[3] 免疫染色の準備
1 器具
2 試薬（LSAB法）
3 ABC法，ポリマー法，mouse on mouseで使用する試薬
[4] 免疫染色プロトコール（LSAB法）
1 作業前の準備
2 プロトコール
3 簡易プロトコール
[5] 染色結果を評価する
1 免疫染色の条件検討
2 免疫染色の答え合わせ（免疫染色）
第6章 in situ ハイブリダイゼーション（ISH）
[1] ISHの原理
1 プローブの種類
2 ISHの手順
3 染色のコントロールのとり方
[2] プローブの設計
1 設計の注意点
2 設計方法
[3] プローブを作製する
1 設計した遺伝子配列の増幅
2 プローブ領域のクローニング
3 in vitro transcription反応によるDIG標識RNA合成
4 ドットブロット法によるプローブの濃度測定
[4] ISH染色
1 準備
2 染色条件の設定
3 プロトコール
4 染色例
第7章 多重染色，その他の染色
[1] ISH（発色）＋免疫染色（発色）
1 二重染色の条件検討
2 二重染色の手順
[2] 免疫染色＋免疫染色
1 免疫染色（発色）＋免疫染色（発色）
2 免疫染色（蛍光）＋免疫染色（蛍光）
[3] HE染色
1 試薬
2 プロトコール
[4] TUNEL染色
1 TUNEL染色の原理
2 プロトコール
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