あなたのタンパク質精製、大丈夫ですか?

出版社: 羊土社
著者:
発行日: 2018-09-15
分野: 基礎・関連科学  >  生命科学
ISBN: 9784758122382
書籍・雑誌
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商品紹介

生命科学の研究者なら避けて通れないタンパク質実験.取り扱いの基本から発現・精製まで,実験の成功のノウハウを余さずに解説します.初心者にも,すでにタンパク質実験に取り組んでいる方にも役立つ一冊です.

目次

  • 第1章タンパク質のこと,ちゃんと知っていますか?
    1.タンパク質とDNA を同じように扱っていませんか?
    2.タンパク質の電気泳動,正しく理解していますか?

    第2章 発現コンストラクト,思い通りにつくれていますか?
    1.タンパク質をコードするDNA配列探しで迷子になっていませんか?
    2.遺伝子の合成はcDNAから,に固執していませんか?
    3.そのDNA塩基配列はホンモノですか?
    4.あなたの変異設計,立体構造に基づいていますか?
    5.目的にあった発現ベクターを選べていますか?
    6.発現プラスミドの作製方法は1種類と思っていませんか?
    7.変異体のデザイン,発現系への変異導入,うまくできていますか?

    第3章 タンパク質の発現が悪いな…と悩んでいませんか?
    1.いつも同じ培地で培養していませんか?
    2.培養液の滅菌処理,適切ですか?
    3.コロニーが全く生えない….そんな経験ありませんか?
    4.大腸菌株のセレクションは適切ですか?
    5.適切な培養液量で培養していますか?
    6.分解している!?培養温度が高すぎませんか?

    第4章 精製でタンパク質を失っていませんか?
    1.溶液のpHは適正ですか?
    2.目的にあった溶液を選んでいますか?
    3.タンパク質が消えた!破砕は適切ですか?
    4.いつも同じ精製プロトコール頼みになっていませんか?
    5.タンパク質のタグ,大差ないと思っていませんか?
    6.不溶性画分のタンパク質,あきらめていませんか?
    7.そのカラム,ダメになっていませんか?
    8.タンパク質の吸光度は一定だと思っていませんか?
    9.その定量法,あなたのタンパク質に適していますか?
    10.タンパク質やバッファーの性質によって定量法を使い分けていますか?
    11.核酸−タンパク質複合体の精製法を知っていますか?

    第5章 その精製タンパク質,目的どおりのものですか?
    1.タンパク質の会合状態は正常ですか?
    2.タンパク質の折りたたみは適切ですか?
    3.精製したタンパク質は本当に目的のものですか?
    4.精製したタンパク質が分解していませんか?
    5.精製したタンパク質の翻訳後修飾が生体内と違っていませんか?

    第6章【大切なタンパク質,保存は万全ですか?】
    1.とりあえずフリーザー,になっていないですか?
    2.冷蔵庫のタンパク質,腐らせていませんか?

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